Etilén -oxid sterilizációs művelet

(1) A vizsgálati követelmények szerint készítse el a spóra -szuszpenziót és a baktériumszeleteket a Bacillus subtilis var. subtilis var. Niger. A baktériumszeleteket dupla rétegű polietilén műanyag zacskókban lezárják, zsákonként 2 szelet . 20 táskákat használnak minden teszthez.
(2) Állítson be egy pontot a sterilizáló belső, középső és külső rétegeibe, összesen 9 pontra. Helyezzen egy táskát minden pont közepére, összesen 18 zsák baktériumszeletekhez. Helyezzen egy másik zsák (2 szelet) baktériumszeleteket szobahőmérsékleten pozitív kontrollként.
(3) Végezzen etilén -oxid sterilizációt teljes terhelési körülmények között az etilén -oxid -koncentráció, a működési idő, a hőmérséklet és a relatív páratartalom szerint a használati útmutatóban megadott szekrényben. A teljes terhelés a sterilizáló céljától függ. A kezelés után vegye ki a baktériumszeleteket, helyezze át őket 5 ml -es tápanyag -tápanyag -tápközegbe, és tükrözi őket egy 37 fokos inkubátorban. Vegye figyelembe a végső eredményeket 7 nap után (kvalitatív kulturális teszt).
A nehezen megvilágítható eredményekkel rendelkező tápanyag-levescsövekhez vegyen 0,2 ml szuszpenziót, és oltja be a tápanyag-agarlemezt. Használjon steril L -botot, hogy egyenletesen terjedjen, és helyezze el a 37 fokos inkubátorba a kultúra számára. 48 óra elteltével festse ki a kenetet, és figyelje meg a kolónia morfológiáját egy mikroszkóp alatt, vagy végezzen más teszteket annak meghatározására, hogy van -e növekedés, vagy a növekedés a teszt baktériumok. Ha nem a teszt baktériumok, akkor a tesztet meg kell ismételni.
(4) A teszt során a kvalitatív és kvantitatív pozitív kontrollcsoportokat és a negatív kontrollcsoportokat egyszerre kell felállítani.
(5) A kvantitatív pozitív kontrollcsoport esetében helyezze ugyanazt a baktériumszeletet szobahőmérsékleten. Miután a fertőtlenítés vagy a sterilizációs tesztcsoport eléri a megadott működési időt, azonnal helyezze el a baktériumszeletek két darabját 5,0 ml PBS -t tartalmazó kémcsövekbe, és mindegyik 80 -szer rázza meg. Vegye ki a mosóoldatot, és számolja meg az élő baktériumtenyésztést a 2.1.1.3 -ban bemutatott módszer szerint.
(6) A kvalitatív pozitív kontrollcsoport esetében helyezze a teszt baktériumszeleteit ugyanabból a tételből szobahőmérsékleten. Miután a sterilizációs tesztcsoport eléri a megadott működési időt, azonnal oltja be a baktériumszeleteket 5,0 ml tápanyag -tápanyag -tápközegbe, helyezze őket inkubátorba a kvalitatív tenyésztés céljából, és figyelje meg, hogy van -e baktériumnövekedés.
(7) A negatív kontrollcsoport esetében oltja be az ugyanazon tételből 2, nem szennyezett mintaszeletet 5,0 ml tápanyag -táptalajba, és helyezze a nem beépített tápanyag -táptalajt egy inkubátorba a kvalitatív tenyésztés céljából, hogy megfigyelje -e a baktériumok növekedését.
(8) A tesztet ötször megismételjük.
(9) Az 5 teszt mindegyikében a pozitív kontroll baktériumszeletek visszanyert baktériumszámának 5 × 10 CFU/szelet és 5 × 10 CFU/szelet között kell lennie; A kvalitatív pozitív kontrollcsoportnak jó baktériumnövekedéssel kell rendelkeznie; és a negatív kontrollnak nem szabad baktériumnövekedni. Ha a pozitív vagy negatív kontroll eredmények nem felelnek meg a fenti követelményeknek, akkor a teszt érvénytelen és megismétlődik.
Értékelési előírások
Az öt sterilizációs tesztben az egyes tesztek kvantitatív pozitív kontrollcsoportja detektált és visszanyert baktériumok száma 5 × 10 cfu/darab 5 × 10 cfu/darab; A kvalitatív pozitív kontrollcsoportnak jó baktériumok növekedése volt. A negatív kontrollnak nem szabad baktériumnövekedni. Ha az összes teszt baktériumdarabnak nincs baktériumnövekedése, a sterilizációt minősítettnek tekintik.
Óvintézkedések
(1) A hőmérséklet és a relatív páratartalom nagy hatással van az etilén -oxid -gáz sterilizációs hatására, ezért a teszt releváns feltételeit szigorúan ellenőrizni kell.
(2) Az etilén -oxid -folyadék feloldhatja a polietilént, a polivinil -kloridot stb. Az etilén -oxid, függetlenül attól, hogy folyékony vagy gáz, károsíthatja a celluloid termékeket, ezért a vizsgálat során gondoskodni kell.
(3) Az etilén -oxid gyúlékony és robbanásveszélyes. Tűz- és robbanásmegelőzési intézkedéseket kell hozni a műveleti helyszínen, és a nyílt lángokat és az elektromos szikrákat nem szabad megengedni.
(4) A túlzott etilén -oxid -gáz belélegzése mérgezési tüneteket okozhat, például fejfájást és hányást, és súlyos esetekben tüdőödémát okozhat. A munkakörnyezetnek jó szellőztetéssel kell rendelkeznie. A 8 órás munkanapon az etilén-oxid-koncentráció nem haladhatja meg az 1,82 mg/m3 (1 ppm), és az expozíciós koncentráció a 15 perces munka során nem haladhatja meg a 9,1 mg/m3 (5,0 ppm) 9,1 mg/m3-ot. Ha mérgezési tünetek jelentkeznek, azonnal hagyja el a jelenetet. Enyhe esetekben lélegezzen friss levegőt, amíg a tünetek eltűnnek; Súlyos esetekben küldje el a kórházba időben.